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teknova培養(yǎng)基pH值對細胞的影響作用

發(fā)布日期:2023-02-07      點擊:1094
  teknova培養(yǎng)基是用來供給細胞營養(yǎng),促使細胞增殖的,也是細胞賴以生長的環(huán)境。細胞培養(yǎng)實驗中用量比較多的就是細胞培養(yǎng)基,雖然細胞培養(yǎng)試驗基本技術(shù)大同小異,但是每種細胞的培養(yǎng)條件卻相差甚遠。若偏離某種細胞所需的培養(yǎng)條件,則會導(dǎo)致細胞表達不同的表型。
  
  常見的培養(yǎng)基添加因子
  
  1、青霉素-鏈霉素(雙抗生素):用于預(yù)防細胞污染
  
  2、胰島素:作為細胞培養(yǎng)的添加劑,可促進細胞增殖、延長細胞壽命,增加蛋白和核酸的表達量。
  
  3、胰島素-轉(zhuǎn)鐵蛋白-硒添加劑(ITS):可降低多種細胞常規(guī)維持和低密度貼壁培養(yǎng)時所需的胎牛血清濃度。
  
  4、地塞米松:一種抗炎糖皮質(zhì)素,對細胞存活、細胞信號傳導(dǎo)和基因表達具有一系列的影響。用于研究細胞凋亡、細胞信號傳導(dǎo)通路和基因表達。
  
  5、氫化可的松:促進表皮上皮細胞和乳腺上皮細胞增殖生長,提高神經(jīng)膠質(zhì)細胞和成纖維細胞的克隆形成率。
  
  6、白細胞介素2(IL-2):IL-2作為T細胞生長因子,可增強NK細胞的細胞溶解活性,并促進B細胞產(chǎn)生免疫球蛋白。常用于NK92細胞的培養(yǎng)。
  
  常見的問題
  
  1、培養(yǎng)基使用效果不佳:應(yīng)定期確認teknova培養(yǎng)基有效期,并確認是否使用細胞相應(yīng)的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基使用不當(dāng)會影響細胞狀態(tài)。例如,293T需用高糖DMEM培養(yǎng),而THP-1則需要用RPMI1640培養(yǎng)!
  
  2、培養(yǎng)基使用時應(yīng)儲存于4ºC并分裝,避免反復(fù)升溫加速谷氨酰胺的降解。
  
  3、不同培養(yǎng)基由于成分不同,顏色也不盡相同,例如DMEM呈鮮紅色,而MEM呈粉紅色。
  
  4、細胞培養(yǎng)過程中,可根據(jù)細胞培養(yǎng)基顏色變化,對培養(yǎng)狀態(tài)進行分析,當(dāng)teknova培養(yǎng)基變橙色甚至黃色時,說明細胞代謝產(chǎn)生了大量酸性物質(zhì),需及時更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
  
  5、培養(yǎng)基開封,或者培養(yǎng)皿/瓶從培養(yǎng)箱中取出時,由于和空氣發(fā)生氣體交換,顏色會變?yōu)樽霞t色,放到CO?培養(yǎng)箱中即可恢復(fù)pH值,顏色變?yōu)檎5孽r紅色。

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